连续流层析-层析介质-纳微科技股份有限公司

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    2020-8-21

任红茹
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孔径均一的整体柱用于分离纯化---

目前所使用的大部分层析柱都是填充柱,protein a层析介质,即将做好的微球介质填充到柱管中。这种用微球介质填充的层析柱容易放大,稳定,重复性好等优点,已被广泛地用于生物制药分离纯化,如抗l生素,疏水层析介质,---,抗l体等---分离纯化都是采用这种方法。但这种方法用于分离纯化---有局限性,主要是由于具有---孔结构且机械强度好的介质微球制备技术难度大。而整体柱由于具有孔径大、孔隙率大、通透性好、机械强度高、压力低、高通量等优点,有利于---及---类(疫l苗)生物大分子的分离纯化。



l体的层析分离步骤基本都可以采用标准化的三步曲:步用protein a介质进行抗l体捕获和浓缩;第二步用离子交换进行中间纯化以去除多聚体,宿主蛋白等杂质;第三步是精纯去除剩余dna,endotoxin,protein a 等微量杂质。在这三步抗l体的分离纯化过程中,层析介质,步的protein a亲和捕获占据分离纯化成本80%以上,也是下游分离纯化的瓶颈所在。亲和层析之所以成本高的主要原因:首先是protein a 价格昂贵,其价格是普通层析介质十几倍;第二,protein a使用寿命短,一般离子交换填料使用寿命多达1000次,而亲和填料寿命通常在100-200次;第三,protein a 用于抗l体的捕获和浓缩,需要处理大体积的发酵液,而亲和步骤载量往往又低于阴阳离子交换层析,使得亲和层析介质使用量比中间纯化或精纯的要多得多。因此,连续流层析,要降低抗l体的生产成本,解决抗l体的生产瓶颈关键在于改进步protein a 亲和捕获。




---相对于宏观物质甚至与---相比都是极其微小的生物体,但与传统蛋白及---生物分子相比,其尺寸又大很多,结构也复杂得多。---结构通常由蛋白质组成外衣壳,由---组成内芯,因此比蛋白和---分子都要复杂很多。---尺寸一般在20-100纳米之间,而---尺寸一般在1000纳米以上,蛋白分子尺寸往往在10纳米以下。人们只能借助电子显微镜才能看到---的结构和形貌。虽然多肽,蛋白,---等生物大分子都有成熟的分离纯化方法,但---到目前也没有一个比较理想的分离方法。





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