苏州纳微科技股份有限公司提供分离纯化-纳微科技股份-抗体生产效率。
表面亲水化改性微球替代亲水性微球 用于抗l体或蛋白纯化分离的层析介质必须具有---的表面亲水性,因此市场上主要的protein a 产品要么是基于亲水多糖类材料,或者是用亲水单体做的基球,这种基球虽然亲水性能好,非特---吸附低但机械强度差。为了保持基球的机械强度并解决介质亲水性问题,纳微采用先合成高机械强度高交联的聚丙l---酯微球,然后通过多步表面亲水化改性,再进行protein a配件偶联。这种方法虽然工艺复杂,但生产的介质既有高机械强度,又有表面亲水性能好,非特---吸附低等特性。因此unimab在抗l体分离过程中,hcp去除效果好, 可以达到软胶protein a 的同等水平。
连续层析提高生产效率 随着细胞培养技术的迅猛发展,蛋白表达量不断增加以及新兴的连续灌流培养技术的发展对下游纯化效率提出越来越高的要求。批次层析越来越难以满足生产的需求,而连续层析由多根串联的层析柱组成,因为第二根柱子可以承接并吸附从根层析柱流穿的,因此根柱子可以持续上样到更高的蛋白穿透从而---提高层析柱的使用载量,进而提高介质利用率,抗体分离纯化,降低生产成本。连续层析可以---提高设备的利用率,缩短生产周期,分离纯化服务,还可以减少缓冲液的消耗。
分离纯化抗l体的目的。野l生型protein a蛋白是金黄色葡l萄球菌细胞壁锚钉蛋白。三维空间上,抗体生产效率,抗l体fc端ch2-ch3区域与protein a蛋白b结构域上两条反相平行的α螺旋结构相互结合。因此protein a与抗l体分子---是与igg1、igg2、igg4有特---结合,使得抗l体分子与发酵液中不具fc端结构的杂质如宿主蛋白与---等有效分离,进而达到纯化目的。protein a 亲和层析介质是通过把proteina 配基偶联到微球介质上制备而成的。因为protein a配基与目标抗l体的作用的专一性,因此亲和层析的分离纯化工艺和方法与抗l体样品杂质含量和种类多少影响不大,使用protein a 介质一步纯化目标抗l体就可以达到95%以上纯度,回收率达到90%以上。亲和纯化效率也基本不受杂质多少影响,而其它分离模式如离子交换,疏水,分子筛等的分离工艺方法及效率大多取决于与目的蛋白同时存在的杂质种类和含量。因此,分离纯化,只要样品杂质不同,即使是纯化同样的目标生物分子,采用的分离工艺和方法就不同。以重组---分离纯化为例,不同厂家虽然生产的是同一目标---,但采用分离纯化方法完全不一样,主要原因就是每家生产的---杂质组成和含量不一样,因此需要不同的纯化工艺。而比---分子量,结构更复杂的抗l体基本可以采用标准化的三步曲,主要原因就是protein a 亲和介质的出现---简化抗l体的分离纯化工艺,但protein a 价格昂贵让抗l体生产厂家爱恨交加。
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